Coombs-testen

Hva er en Coombs-test?

Coombs-testen brukes til å oppdage antistoffer mot røde blodlegemer (erytrocytter). Et såkalt Coombs-serum brukes til å bestemme antistoffene. Det er oppnådd fra serumet til kaniner og sensibilisert for humane antistoffer.
Testen brukes hvis hemolytisk anemi, rhesus inkompatibilitet eller kort tid før det er mistanke om en blodoverføring. Hemolytisk anemi er en form for anemi og rhesus inkompatibilitet beskriver en inkompatibilitet med blodgrupper.
Det er to forskjellige typer Coombs-test, den direkte og indirekte testen er forskjellige når det gjelder indikasjon og utførelse.

Årsakene til en Coombs-test

Den direkte Coombs-testen brukes hvis det er mistanke om hemolytisk anemi. Hemolytisk anemi beskriver anemi der blodcellene brytes ned for tidlig på grunn av skade.
Ved autoimmune sykdommer som systemisk lupus erythematosus, revmatoid artritt eller kronisk lymfatisk leukemi, dannes antistoffer som er rettet mot kroppens egne blodceller (såkalte erytrocytter). Bindingen av antistoffene fører til tidlig nedbryting av blodcellene eller til klumping av blodcellene i karene. Begge disse fører til et fall i hemoglobinverdien.

En annen indikasjon for direkte Coombs-test er hemolyticus neonatorum sykdom, her dannes antistoffer mot rhesusfaktoren i kroppen til den rhesus-negative moren. Hvis det ufødte barnet er rhesus-positivt, kan antistoffene fra mødrene komme inn i fosterets sirkulasjon og starte en økt nedbrytning av blodcellene der. Nyfødte skiller seg ut med alvorlig anemi og gulsott.

Coombs-testen brukes regelmessig i transfusjonsmedisiner. Det brukes til å bestemme blodgrupper før en blodoverføring (nattprøve), der en liten blodprøve blandes med forskjellige sera fra blodgruppene A, B, AB og 0. Hvis blodet forblir flytende, er pasientens blod forenlig med den tilsvarende blodgruppen. Transfusjonen kan utføres.

Den indirekte Coombs-testen kan også brukes til å søke etter frie antistoffer i pasientens kropp (antistoff-søketest), f.eks. under barselkontroller, som forberedelse til en transfusjon for onkologiske pasienter eller personer som allerede har fått en blodoverføring.

Finn ut alt om emnet her: Rh intoleranse.

Forberedelsen

Som forberedelse til Coombs-testen, fremstilles først sera med antistoffer som skal testes for. De fylles i forskjellige prøverør eller påføres testkort.

I hverdags klinisk praksis f.eks. med nattbordstesten er det allerede forberedte testkort som kan brukes umiddelbart. Deretter trekkes blod fra pasienten og forberedes for testen. Avhengig av hvilken type Coombs-test som blir utført, trenger man blodcellene eller serumet (flytende del av blodet) til pasienten.

Sekvensen

Hvis det utføres en direkte Coombs-test, filtreres de røde blodlegemene ut av pasientens blod. Det skal testes om det er antistoffer av IgG-typen på dem, som forårsaker hemolytisk anemi eller blodgruppens uforenlighet i kroppen. Coombs-serumet inneholder antistoffer mot humane IgG-antistoffer. Blandingen blir oppvarmet (inkubert) i lang tid. Hvis det er antistoffer på de røde blodlegemene, klumper de seg og testen blir positiv.

Den indirekte Coombs-testen består av to deler. Målet er å bestemme antistoffer som er frie i blodet og ikke er bundet til blodceller.
Denne gangen filtreres den flytende delen (serum) fra pasientens blod. Først tilsettes røde blodlegemer til serumet for testen. Hvis det er gratis antistoffer i serumet, vil de binde seg til de røde blodlegemene. Denne reaksjonen er ikke synlig. Bare i det andre trinnet, som i den direkte Coombs-testen, blir Coombs serum med antistoffer mot humane antistoffer tilsatt og varmet opp. Også her klumper løsningen seg hvis resultatet er positivt.

Evalueringen

Hvis antistoffer kombineres med et passende Cooms-serum, bindes antistoffer i serumet (flytende del av blodet) med pasientens antistoffer. Antistoffer er Y-formet, noe som betyr at de alltid kan binde to bindingspartnere og dermed tverrbinde røde blodlegemer med hverandre. Det skapes en stor ansamling av blodceller. Disse klumpene blir synlige - blodet agglutinates (klumper) og testen er positiv.
Hvis pasienten ikke har passende antistoffer, forblir serumet flytende. Du kan ikke se noen endring - testen er negativ.

Hva er alternativene?

Et alternativ til Coombs-testen er den immunologiske ELISA-metoden (enzymbundet immunosorbentanalyse), der visse antistoffer er merket med et enzym. Dette antistoffet blir tilsatt til testløsningen. Hvis de merkede antistoffene reagerer med antistoffene i testløsningen, aktiveres det bundne enzymet og produserer et fargestoff. Tilsvarende prøverør skifter farge - testen er positiv.

I tillegg til ELISA-prosedyren, er det også Western blot, som ofte brukes som en bekreftende test for en positiv ELISA.